Mysterio aparece en el episodio “The Moon Knight Before Christmas”, es mostrado como un viejo enemigo de Spider-Man y como un mago retirado que supuestamente murió después de caer del Puente de Brooklyn. Spider-Man nadó en el río y encontró el casco de Mysterio, después, decide dárselo a Doctor Strange para proteger el Sactoroum. Pero no todo termina así, Spider-Man descubre que el alma de Mysterio sigue atrapada en su casco, por lo cual acude a la aventura. Recordando la frase de Doctor Strange “El Enemigo de mi Enemigo es mi Amigo”, Spidey recurre a Moon Knight. Mysterio aparece haciendo un pacto con Dormammu, como Mysterio dice que su alma está perdida Spider-Man lo persigue, mandándolos a él junto con Frances Beck a la realidad. Al final todos cenan con la Tía May.
Mysterio es el principal antagonista de la película, aunque primero aparece como una figura heroica. Mysterio aclara ser un ex-empleado de las industrias STARK, en donde inventó el B.A.R.F., un sistema de hologramas para hacer ilusiones ópticas. A pesar de sonar como un buen invento, Tony Stark lo despidió por ser inservible. Después del fallecimiento de Stark en Avengers: Endgame, Beck decide tomar venganza del legado de Stark.
Con la ayuda de ex-empleados de Stark, creó 4 monstruos conocidos como los Elementales, y toma la identidad de un guerrero proveniente de Tierra-833, un Planeta Tierra alternativo donde los elementales destruyeron todo a su paso, incluyendo a la familia de Beck. Beck decide usar la tecnología STARK para así poder crear a los elementales para pretender derrotarlos, pero aún así el está engañando a la gente, pues el no es ningún héroe. El destruye al elemental de Tierra en México, llamando la atención de “Nick Fury” y del Elemental del Aire en Marruecos.
En Venecia, Beck se encuentra con Peter Parker mientras “derrotaba” al Elemental de Agua, después ellos se conocen mejor en una misión secreta ordenada por Nick Fury, para derrotar al Elemental de Fuego. Los compañeros de Peter describían a Mysterio como una mezcla de Iron Man y Thor. Aunque Parker decía que era peligroso, Fury lo lleva junto a sus compañeros a Praga, después de que Beck derrotara al Elemental de Fuego, Peter le pasa sus lentes, creyendo que Beck los merecía, lo que Peter no sabía, es que Beck es un villano. A escondidas de Peter, Beck decide hacer mal uso de la tecnología STARK para seguir engañando a la gente, pero por suerte, gracias a Michelle Jones, Peter se da cuenta de esto y decide avisarle a Nick Fury sobre Beck en Berlin, pero para su mala suerte, este era Beck disfrazado de Fury, atrapándolo en una gama de ilusiones.
Sabiendo que algunos compañeros de Peter sabían de él, Beck los envía a Londres para el poder crear sus ilusiones. Peter Parker es arrestado, Mysterio creía que él ya había ganado, pero Peter escapa y lo derrota. Mysterio acepta lo que el hizo y muere después de que los drones lo atacaran, pero después Peter y MJ se enteran de que Beck envió un video alterado donde acusa a Spider-Man de atacarlo con los drones y así, revelando su identidad secreta.
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